國(guó)產(chǎn)紫外分光光度計(jì)是一種基于物質(zhì)對(duì)紫外光吸收特性的重要分析儀器。 一、工作原理
工作基于比爾-朗伯定律,即物質(zhì)對(duì)光的吸收程度與物質(zhì)的濃度成正比。當(dāng)一束紫外光照射到待測(cè)樣品時(shí),樣品中的分子會(huì)選擇性地吸收特定波長(zhǎng)的光。這是因?yàn)榉肿又械碾娮釉谖仗囟芰康墓庾雍髸?huì)發(fā)生能級(jí)躍遷。
國(guó)產(chǎn)紫外分光光度計(jì)主要由光源、單色器、吸收池、檢測(cè)器和信號(hào)處理器等部件組成。光源提供連續(xù)的紫外光,常用的有氫燈和氘燈,它們能夠發(fā)出紫外光區(qū)的不同波長(zhǎng)光。單色器負(fù)責(zé)將復(fù)合光分解為單色光,只允許特定波長(zhǎng)的光通過并照射到樣品上。吸收池用于盛放樣品,由于紫外光易被普通玻璃吸收,所以在紫外光區(qū)通常使用石英吸收池。樣品在吸收池中對(duì)特定波長(zhǎng)的光進(jìn)行吸收后,透射光或吸收光的強(qiáng)度會(huì)發(fā)生變化。檢測(cè)器將這種光強(qiáng)的變化轉(zhuǎn)化為電信號(hào),信號(hào)處理器再對(duì)該電信號(hào)進(jìn)行放大、處理,得到樣品的吸光度等數(shù)據(jù),進(jìn)而可繪制出吸收光譜。
二、應(yīng)用領(lǐng)域
1、化學(xué)領(lǐng)域
在有機(jī)化學(xué)中,可用于有機(jī)化合物的結(jié)構(gòu)分析和定量測(cè)定。通過測(cè)定化合物在不同波長(zhǎng)下的吸光度,確定其是否含有共軛結(jié)構(gòu)或者某些特定的官能團(tuán)。對(duì)于無(wú)機(jī)化合物,能分析金屬離子的存在形式和濃度,像測(cè)定水中的重金屬離子污染情況。
2、生物領(lǐng)域
在蛋白質(zhì)研究中,可測(cè)定蛋白質(zhì)的濃度。因?yàn)榈鞍踪|(zhì)含有芳香族氨基酸,在特定波長(zhǎng)下有吸收峰。同時(shí),也能對(duì)核酸進(jìn)行定量分析,在260nm處,DNA和RNA有明顯的吸收。此外,還在酶活性研究方面發(fā)揮作用,通過監(jiān)測(cè)底物或產(chǎn)物在反應(yīng)過程中的吸光度變化來(lái)確定酶的活性。
3、醫(yī)藥領(lǐng)域
用于藥物成分的分析和質(zhì)量控制??梢耘袛嗨幬镏杏行С煞值暮渴欠穹蠘?biāo)準(zhǔn),并且能檢測(cè)藥物中的雜質(zhì)種類和含量。同時(shí),在藥物代謝研究中,監(jiān)測(cè)藥物在體內(nèi)的代謝產(chǎn)物的濃度。
4、環(huán)境保護(hù)方面
可以對(duì)水質(zhì)中的有機(jī)污染物、重金屬離子等進(jìn)行檢測(cè)。在空氣質(zhì)量監(jiān)測(cè)中,用于檢測(cè)大氣中的某些有機(jī)揮發(fā)性物質(zhì)。
5、工業(yè)生產(chǎn)中
在制藥、食品、化工等行業(yè),用于過程控制和產(chǎn)品質(zhì)量檢測(cè)。如在制藥業(yè)的藥品合成過程中,監(jiān)測(cè)反應(yīng)進(jìn)程中的中間產(chǎn)物濃度;在食品工業(yè)中檢測(cè)食品添加劑的含量是否符合標(biāo)準(zhǔn)等。